目前，研究AD的方法主要包括动物模型和细胞模型。动物模型能真实模拟动物体内AD的病理特征，而细胞模型能在微观层面研究AD的发病机制，并可根据研究目的的不同选择构建适宜的细胞模型。然而，目前总结AD细胞模型方法的文献报道较少。因此，本节将从造模试剂、细胞模型建立方法及评价指标等方面对建立AD细胞模型的方法进行综述，进一步梳理各细胞模型的特点，并根据造模物质的神经毒性、氧化应激、Tau蛋白异常磷酸化等作用机制方面对其进行分类总结，旨在为后续研究AD的发病机制及相关药物开发提供参考。
一、造模试剂
（一）神经毒性损伤
（1）Aβ：Aβ来自于其前体淀粉样蛋白前体蛋白（amyloidprecursorprotein, APP）第672～711残基裂解片段，APP经β-和γ-分泌酶连续剪切后形成长度在39～42个氨基酸的短肽。APP表达量增多时，导致Aβ过量产生，从而造成Aβ积聚形成SPs。据报道，Aβ可直接或间接对线粒体结构及功能造成损伤，进而诱发氧化应激、激活凋亡信号通路等级联反应，导致大量的神经元细胞损伤。此外，Aβ积聚也会导致Tau蛋白过度磷酸化、突触连接障碍、炎症反应等。目前研究常采用20μmol/L浓度的Aβ1～42、Aβ25～35诱导细胞建立AD细胞模型。
（2）谷氨酸：谷氨酸（glutamate, Glu）是大脑中主要的兴奋性神经递质，同时也被认为是新皮质和海马锥体神经元的主要神经递质，涉及认知功能等方面。研究表明，谷氨酸能神经元位于AD中受影响的区域，其作用是通过控制突触中谷氨酸的浓度，将神经冲动转化为化学刺激，并在突触前神经元中通过2个囊泡谷氨酸转运蛋白（vesicularglutamatetransporter, VGLUT）1和VGLU2维持储存在囊泡中的谷氨酸水平。当神经元去极化时，过量的谷氨酸被释放到突触间隙，导致突触前和突触后神经元上的谷氨酸受体过度刺激，造成钙大量涌入、活性氧（reactiveoxygenspecies, ROS）产生，引起氧化应激反应及最终的神经细胞死亡。目前谷氨酸常采用10μmol/L的浓度诱导细胞建立AD模型。
（3）甲醛：甲醛（formaldehyde, FA）是毒性最强的有机化合物之一，广泛分布于生物体和环境中。研究发现，AD患者尸检的海马中FA水平显著升高，因此AD的发病机制与甲醛密切相关。文献报道FA异常升高与认知障碍有关，如学习能力下降和记忆丧失；其也可促进AD的主要病理特征形成，包括Aβ沉积、Tau蛋白过度磷酸化和神经元丢失，同时伴有细胞功能障碍甚至细胞凋亡。研究采用0.35mmol/L的FA诱导N2a细胞，导致细胞凋亡率增高，Tau蛋白过度磷酸化。
（4）甘油醛：甘油醛（glyceraldehyde, GA）呈剂量依赖性地促进神经细胞中GA衍生晚期糖基化终末产物（GA-AGEs）的产生。GA-AGEs主要存在于海马和海马旁回的神经元中，具有强烈的神经毒性，研究表明，经0.7mmol/LGA诱导的SH-SY5Y细胞出现凋亡；细胞内产生GA引起甘油醛-3-磷酸脱氢酶失活，进一步增加SH-SY5Y细胞内GA浓度，导致GA-AGEs产生和神经细胞毒性增强。
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