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阿尔茨海默病:从基础到临床_金戈(第三节 阿尔茨海默病的细胞模型) 第(3/6)页

目前,常用于诱导人神经母细胞瘤细胞建立AD模型的造模试剂包括,Aβ、H2O2、AGEs、GA、OA、SiNPs等,其诱导时间大多为24h或48h。检测指标主要有细胞活力、凋亡率及相关凋亡蛋白表达、氧化应激相关指标、Tau蛋白磷酸化水平等。因此,该类细胞模型主要体现AD疾病的细胞凋亡、氧化应激、Tau蛋白磷酸化等病理特征。

(二)NG108-15细胞株

NG108-15细胞株是由小鼠神经母细胞瘤(neuroblastoma)和大鼠神经胶质瘤(glioma)细胞杂交形成的神经肿瘤细胞。Tojima等发现该细胞株经分化剂丁酰环磷酸腺苷(dibutyrylcyclicadenosinemonophosphate, db-cAMP)刺激分化后,表现出神经元样形态,具有神经突结构;同时,通过比较研究发现未分化和分化的NG108-15细胞株均能不同程度表达神经元蛋白和神经胶质蛋白,但未分化的细胞仅能表达神经胶质蛋白,如波形蛋白,而极少表达神经元蛋白,如神经丝蛋白(neurofilament, NF)200、磷酸化NF200,因此认为未分化的NG108-15细胞株不是神经元样细胞;此外,分化后的NG108-15细胞株也能表达ChAT蛋白,揭示该细胞能合成神经递质乙酰胆碱。

NG108-15细胞株常应用于AD等与认知、记忆相关的体外研究。研究常采用Aβ25~35、OA等诱导NG108-15细胞株,其模型主要机制涉及细胞凋亡、Tau蛋白异常磷酸化等,与AD患者脑组织中的病理特征一致,可作为研究AD的细胞模型。具体造模方法见表3-3-1。

(三)小鼠神经母细胞瘤细胞

克隆的小鼠神经母细胞瘤细胞(mouseneuroblastomacells, N2a/Neuro-2a)是从A株白化鼠的自发性肿瘤而建立,该肿瘤系被命名为C1300。该细胞多数呈神经元样,具有轴突样结构,部分细胞间可见突起交织成网络样结构。研究显示N2a细胞表达核受体相关因子1并产生低水平的TH和多巴胺;但经0.5mmol/ Ldb-cAMP处理后,N2a细胞中TH和多巴胺水平均显著增强,从而促进多巴胺能神经元的形成。

目前,N2a细胞作为体外研究AD发病机制的常见细胞模型。研究常采用Glu、FA、SiNPs等物质诱导N2a细胞建立AD模型,其模型的诱导物质处理时间大多为24h。N2a细胞经造模试剂诱导后常出现Aβ沉积、Tau蛋白过度磷酸化、氧化损伤、细胞凋亡等AD样的病理学特征。

(四)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(ratphcochromocytomacell, PC12)来源于大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤,是一种研究神经细胞生理、病理及药理的理想细胞。该细胞具有一定的神经内分泌属性,其细胞能合成多巴胺及去甲肾上腺素等儿茶酚胺类神经递质,并储存于细胞囊泡中通过胞吐作用释放。同时,PC12细胞膜上具有神经生长因子(nervegrowthfactor, NGF)受体,经NGF诱导刺激后可转化为具有神经元特性的神经元样细胞,如PC12细胞突起明显延长、交织,呈现典型神经元形态;细胞抗神经元分化标志微管相关蛋白(microtubuleassociatedprotein, MAP)2染色呈强阳性。PC12细胞常用于神经系统疾病的体外研究。学者常采用Aβ25-35、Glu、H2O2等诱导PC12细胞建立AD细胞模型,其药物处理时间为24h或48h。PC12细胞经造模试剂诱导后主要涉及氧化损伤、细胞凋亡等方面。具体造模方法见表3-3-1。

(五)小鼠海马神经元细胞系


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